Актуальность проведенного исследования
В настоящее время широко распространены заболевания, связанные с нарушением резорбтивной функции кишечника у домашних свиней и птиц.
Энтериты приносят хозяйствам промышленного типа значительный экономический ущерб, что связывают со снижением производственных показателей за счет уменьшения суточного прироста живой массы животных вследствие потери аппетита, с падежами и с увеличением неоднородности стада [2, 6]. Диагностика воспалительных заболеваний кишечника в ветеринарии применяется активно, но все использующиеся для этого методы являются достаточно временнозатратными [1, 3, 5, 8].
использующиеся в настоящее время
Цель исследования
Оценка точности и чувствительности экспресс-метода «Индикал» для диагностики энтеритов различной этиологии у цыплят-бройлеров и свиней.
Материалы и методы
Лабораторные исследования были проведены на базе сектора молекулярной биологии СФНЦА РАН.
Известные методы диагностики энтеритов
- Общий анализ крови
- Рентгенологическое исследование
- Биохимический анализ крови
- Эндоскопическое исследование ЖКТ
- Использование путеспецифичных маркеров
- Общий и биохимический анализ фекалий
- Флотационные методы, связанные с выявлением поражений кишечника паразитами
Для оценки точности и чувствительности экспресс-метода «Индикал» были сформированы 2 группы (контрольная и опытная) 20-дневных цыплят-бройлеров кросса Hubbard F15 и 2 группы (тоже контрольная и опытная) 45-дневных поросят породы PIC. В контрольные группы входили здоровые особи, а в опытные – с клиническими признаками диарейного синдрома.
Влажность кала птиц и свиней оценивалась с применением разработанного нами ранее оригинального экспресс-метода «Индикал» [4, 7]. Тест-система представляет собой полоску из фильтровальной бумаги, на контактную сторону которой нанесен тонкодисперсный порошок водорастворимого красителя Light Green SF Yellowish, покрытый для изоляции от влаги листом прозрачного полимера на клеящей основе. На обратной стороне тест-системы размещена шкала с 10-миллиметровым шагом.
Пробу кала помещали на контактную сторону тест-полоски, и реакция влаги с мелкодисперсным красителем приводила к образованию окрашенного пятна. Далее мы выявляли зависимость между объемом содержащей в пробе кала влаги и площадью окрашенного пятна. Затем на основании измерения площади пятна определяли содержание в пробе влаги.
Площадь окрашенного пятна вычисляли с помощью программного обеспечения ImageJ. Данные обрабатывали методом вариационной статистики с расчетом U-критерия Манна – Уитни и с использованием программного обеспечения Excel. Коэффициент корреляции рассчитывали по Пирсону.
Результаты исследования
Для наглядной демонстрации практического значения и эффективности экспресс-метода «Индикал» были взяты 8 проб кала цыплят (5 проб от больных птиц и 3 пробы от здоровых) и 9 проб кала свиней (6 проб от животных с клиническими признаками энтерита и 3 пробы от здоровых).
Тест-системы представляли собой листы в форме квадрата со стороной 70 мм. Предварительно была определена масса каждого листа. Затем на тест-системы поочередно помещали пробы кала массой от 5 до 50 г. После просушивания проб естественным путем в течение 30 минут тест-системы вновь взвешивали и измеряли площадь образовавшегося на них пятна. С помощью разности масс каловых проб до и после нанесения на тест-систему вычислили индекс влажности кала.
Результаты исследования кала свиней и цыплят-бройлеров
| № группы | Клиническое состояние животных | Средняя масса проб, t, ±SD | Площадь пятна, мм², ±SD | Объемный индекс влажности, ±SD | CV, % |
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | Больные (С) | 15,8 ±12,4 | 240,0 ±92,9 | 27,03 ±25,03 | 85,19 |
| 2 | Здоровые (С) | 25,0 ±18,0 | 117,7 ±92,6 | 4,7 ±0,8 | 16,62 |
| 3 | Больные (Ц) | 14,0 ±8,2 | 390,1 ±73,8 | 34,9 ±15,6 | 44,7 |
| 4 | Здоровые (Ц) | 41,7 ±10,4 | 212,2 ±70,7 | 5,04 ±0,6 | 11,9 |
Вследствие нарушений гомеостаза в кишечнике клинически больные животные характеризуются наибольшим разбросом значений влажности кала. Площадь пятна (зависящая от влажности пробы) находится в зоне значимости Uэмп (0). Пробы кала больных свиней и птиц образуют на тест-системах пятна достоверно большей площади, чем пробы, взятые от здоровых. Значение объемного индекса влажности, рассчитанное по этому критерию, находится в зоне значимости Uэмп (0), то есть объемный индекс влажности кала у больных свиней и птиц тоже достоверно больше.
Чувствительность теста обеспечила дополнительное выявление свиньи с повышенным уровнем экссудативных процессов в кишечнике, которая изначально, на основании клинической диагностики, была включена в группу здоровых животных.
Таким образом, клиническая оценка кала животных менее точна, чем оценка с использованием предлагаемого нами экспресс-метода диагностики. Высчитывая объемный индекс влажности по соотношению площади пятна и массы взятого образца кала, можно говорить о большем содержании влаги в испражнениях больных животных. У больных цыплят среднее значение объемного индекса влажности кала выше, чем у здоровых, в 6,9 раза, а у больных свиней – в 5,7 раза. Высчитав стандартное отклонение для здоровых животных, можно говорить о нормальном распределении влаги на фильтровальной бумаге (для здоровых цыплят индекс равен 5,04 ±0,6, а для здоровых свиней – 4,7 ±0,8 [4, 7]).
Заключение
Процесс диагностики функционального состояния кишечника свиней и птиц путем изучения влажности их кала с помощью экспресс-метода «Индикал» методически целесообразно разделить на два этапа. Первый этап – опытный: подготовка и применение тест-систем, получение числовых данных. Второй этап – аналитический: обработка полученных данных с использованием программного обеспечения ImageJ и Excel.
У клинически здоровых свиней показатель объемного индекса влажности кала был в 5,7 раза ниже, чем у клинически больных, а у здоровых цыплят по сравнению с больными он был ниже в 6,9 раза.
Для клинически здоровых свиней показатель объемного индекса влажности кала должен составлять 4,7 ±0,8, а для клинически здоровых цыплят-бройлеров – 5,04 ±0,6.
Экспресс-метод «Индикал» по сравнению с клинической оценкой функционального состояния кишечника свиней и птиц является методом более чувствительным. Кроме того, он самый эффективный и быстрый в ряду других использующихся в настоящее время методов диагностики воспалительных процессов в кишечнике свиней и птиц.
Разработанная нами тест-система «Индикал» может использоваться и в экспериментальных целях, и на промышленных предприятиях (для оценки эффективности ветеринарных мероприятий и для оценки влияния кормовых добавок на состояние свиней и птиц с воспалительными заболеваниями кишечника).
Библиографический список
- Иванов А. А. Клиническая лабораторная диагностика : учебное пособие. Санкт-Петербург : Лань, 2017. С. 313–415.
- Мамедов А. А. Заражение протоколам и геофизическим возбудителем домашних птиц в Азербайджане // Эпизоотология, иммунобиология, фармакология и санитария. 2018. № 1. С. 3–6.
- Мейер Д., Харви Дж. Ветеринарная лабораторная медицина. Интерпретация и диагностика [пер. с англ]. Москва : Софмон, 2007. С. 244–296.
- Патент № 2701559 Российская Федерация, МПК G01N 19710. Способ диагностики энергии сельскохозяйственных животных и птиц : № 2019112325 : заявл. 23.04.2019 : опубл. 30.09.2019 / Парлюк А. О., Бобякова А. С., Афонишкин В. Н., Сигарева Н. А. ; заявитель ФГБОУ ВО «Новосибирский государственный аграрный университет» 9 с.
- Патент № Российская Федерация МПК G01N 33668 (2006.01) № 2015155590 А от 22.05.2014.
- Хованских А. Е., Ипошечкин Ю. П., Кириллов А. И. Командное сельскохозяйственной пищевые препараты : Агропромиздат. Ленинградское отделение, 1990. 152 с.
- Экспресс-метод диагностики воспалительных процессов в кишечнике свиней и цыплят-бройлеров (О. А., Фролова, В. Н., Афонишкин, А. С., Бобякова И. А. ). Международный вестник ветеринарии. Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины. 2020. № 4. С. 214–220.
- Миколай Шутинко. «Поставка» на работе свиней и птиц в Азербайджане // Единственная практика. 2013. Vol. 7 гг. № 2. Р. 390.
Авторы:
А. С. Бобикова, младший научный сотрудник сектора молекулярной биологии Сибирского федерального центра агробнотехнологий Российской академии наук (СФНЦА РАН), аспирант кафедры акушерства, анатомии и гистологии федерального государственного бюджетного учреждения высшего образования «Новосибирский государственный аграрный университет» (ФГБОУ ВО Новосибирский ГАУ), Новосибирск
В. Н. Афонюшкин, кандидат биологических наук, заведующий сектором молекулярной биологии СФНЦА РАН, сотрудник Института химической биологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук, Новосибирск
О. А. Фролова, аспирант кафедры анатомии, патологической анатомии и хирургии федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Красноярский государственный аграрный университет», Красноярск
Н. А. Сигарева, кандидат биологических наук, доцент кафедры акушерства, анатомии и гистологии ФГБОУ ВО Новосибирский ГАУ, Новосибирск
Источник Журнал БИО 3 (246) МАРТ 2021
